 |
مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لنظير السل الفطري
【اسم المنتج】مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لنظير السل الفطري
【طَرد】50 الاختبارات
【إشارة】إن مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لداء المتفطرة نظير السل قابلة للتطبيق للكشف عن Mycobacterium Paratuberculosis RNA في مسحة الأنف والحليب وعينات السوائل المشتركة.نتائج الاختبار لغرض البحث فقط وليس للتشخيص السريري.
【المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
محلول رد فعل PMB | 1000 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
التحكم الإيجابي في PMB | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
【التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR (مثال على ABI 7500 ، راجع هذه العملية ودليل ABI 7300 و LC480.)
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 20 ميكرو لتر من محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر من الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PRC المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، وضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري.
3. تضخيم qRT-PCR
3.1 قناة إشارة الإسفار: يتم ضبط وضع الكشف عن المسبار على النحو التالي: Reporter Dye1: FAM و Quencher Dye: NONE.
2.3 يجب ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
معلمات التضخيم | |||
نظام | الحجم الإجمالي 25 ميكرولتر | ||
شروط رد فعل PCR | مرحلة | شروط | دورات |
عملية UNG | 37 ℃ لمدة دقيقتين | 1 | |
قبل التمسخ | 95 ℃ لمدة 30 ثانية | 1 | |
PCR | 95 ℃ لمدة 10 ثوانٍ |
40 | |
60 ℃ لمدة 30 ثانية اضبط لتجميع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة | |||
【تفسير النتائج】
1. حكم الصحة:
1.1 التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقناة FAM ≤ 32 ، ولمنحنى التضخيم مرحلة نمو أسي كبيرة.
1.2 التحكم السلبي: لا تحتوي قناة FAM على منحنى تضخيم ، أو أن منحنى التضخيم هو خط مستقيم أو خط مائل طفيف.
2. حكم نتيجة الاختبار:
إذا كانت قناة اكتشاف FAM لعينة الاختبار لديها لا يوجد منحنى تضخيم، يمكن تحديده على أنه PMB سلبي.
إذا كانت قناة اكتشاف FAM تحتوي على منحنى تضخيم أسي متزايد وقيمة Ct هي 36، يمكن تحديده على أنه PMB إيجابي.
36 يجب اعتبار العينات على أنها نتائج مشكوك فيها، ويجب تكرار التحليل للتأكيد.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر تضخيم الجينات PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب تنفيذ معطف المعمل والقفازات والماصة التي تستخدم لمرة واحدة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، يتم معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، Bandaohuigu Industrial Park ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
الرمز البريدي: 262233
هاتف: +86-0532 5882 0810
مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لنظير السل الفطري
【اسم المنتج】مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لنظير السل الفطري
【طَرد】50 الاختبارات
【إشارة】إن مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لداء المتفطرة نظير السل قابلة للتطبيق للكشف عن Mycobacterium Paratuberculosis RNA في مسحة الأنف والحليب وعينات السوائل المشتركة.نتائج الاختبار لغرض البحث فقط وليس للتشخيص السريري.
【المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
محلول رد فعل PMB | 1000 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
التحكم الإيجابي في PMB | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
【التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR (مثال على ABI 7500 ، راجع هذه العملية ودليل ABI 7300 و LC480.)
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 20 ميكرو لتر من محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر من الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PRC المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، وضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري.
3. تضخيم qRT-PCR
3.1 قناة إشارة الإسفار: يتم ضبط وضع الكشف عن المسبار على النحو التالي: Reporter Dye1: FAM و Quencher Dye: NONE.
2.3 يجب ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
معلمات التضخيم | |||
نظام | الحجم الإجمالي 25 ميكرولتر | ||
شروط رد فعل PCR | مرحلة | شروط | دورات |
عملية UNG | 37 ℃ لمدة دقيقتين | 1 | |
قبل التمسخ | 95 ℃ لمدة 30 ثانية | 1 | |
PCR | 95 ℃ لمدة 10 ثوانٍ |
40 | |
60 ℃ لمدة 30 ثانية اضبط لتجميع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة | |||
【تفسير النتائج】
1. حكم الصحة:
1.1 التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقناة FAM ≤ 32 ، ولمنحنى التضخيم مرحلة نمو أسي كبيرة.
1.2 التحكم السلبي: لا تحتوي قناة FAM على منحنى تضخيم ، أو أن منحنى التضخيم هو خط مستقيم أو خط مائل طفيف.
2. حكم نتيجة الاختبار:
إذا كانت قناة اكتشاف FAM لعينة الاختبار لديها لا يوجد منحنى تضخيم، يمكن تحديده على أنه PMB سلبي.
إذا كانت قناة اكتشاف FAM تحتوي على منحنى تضخيم أسي متزايد وقيمة Ct هي 36، يمكن تحديده على أنه PMB إيجابي.
36 يجب اعتبار العينات على أنها نتائج مشكوك فيها، ويجب تكرار التحليل للتأكيد.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر تضخيم الجينات PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب تنفيذ معطف المعمل والقفازات والماصة التي تستخدم لمرة واحدة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، يتم معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، Bandaohuigu Industrial Park ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
الرمز البريدي: 262233
هاتف: +86-0532 5882 0810
