 |
مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / النوع الفرعي العام RNA (اختبار PCR- التألق)
【اسم المنتج】
مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لفيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / النوع الفرعي العام
【طَرد】
50 مجموعة / صندوق
المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
H5 / H7 / H9 / محلول التفاعل الثلاثي التكافؤ العام | 1250 ميكرولتر / أنبوب | 1 |
H5 / H7 / H9 / التحكم الإيجابي العام | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【نموذج】
ABI 7500 و ABI QuantStudio 5 و CFX Connect و CFX Opus 96 و LightCycler480 و Gentiter 96E / 96R و LineGene 9600 Plus ومضخم PCR الكمي الفلوري.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 25 ميكرولتر إلى محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PCR المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، ووضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري ..
2.3 يتم ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
المعلمات ذات الصلة لمكبر الصوت | |||
نظام | الحجم الإجمالي: 30 مايكرولتر | ||
جمع الإشارات
| أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / عام
| النوع الفرعي H5 - تجمع قناة HEX إشارة التألق | |
النوع الفرعي H7 - تجمع قناة FAM إشارة التألق | |||
النوع الفرعي H9 - تجمع قناة Cy5 إشارة التألق | |||
عام - تجمع قناة ROX إشارة التألق | |||
شروط تفاعل PCR
| منصة | Condition | رقم الدورة |
النسخ العكسي | 55 ℃: 15 دقيقة | 1 | |
الأجيال السابقة | 95 ℃: 30 ثانية | 1 | |
PCR
| 95 ℃: 10 ثوانٍ |
40
| |
56 ℃: 30 ثانية (اضبط لجمع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة) | |||
تفسير النتائج】
1. تحديد فعالية مجموعة الاختبار:
(1) ضعف التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقنوات FAM و HEX و Cy5 و ROX ≤ 32 ، ومنحنى التضخيم بمرحلة أسية واضحة.
(2) التحكم الفارغ: لا تحتوي قنوات FAM و HEX و Cy5 و ROX على منحنى تضخيم ، أو أن منحنى التضخيم مائل مستقيم أو طفيف ، ولا توجد مرحلة أسية كبيرة ، وقيمة Ct ≥ 38 أو لا قيمة Ct.
2. تحديد النتائج:
نتيجة الحكم | قناة FAM | قناة HEX | قناة Cy5 | قناة ROX |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H5 إيجابي | - | + | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H7 إيجابي | + | - | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي H9 من الحمض النووي إيجابي | - | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | + | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H9 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | - | + | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H7 / H9 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 من النوع الفرعي للحمض النووي إيجابي | + | + | + | + |
انخفاض الحمض النووي لفيروس أنفلونزا الطيور الممرض إيجابي | - | - | - | + |
الحمض النووي لفيروس انفلونزا الطيور سلبي | - | - | - | - |
*ملحوظة:
(1) إذا كان هناك منحنى تضخيم طور لوغاريتمي وقيمة Ct ≤ 36 ، فيتم الحكم عليها على أنها +.إذا لم يكن هناك منحنى تضخيم أو قيمة Ct> 36 ، فسيتم الحكم على أنها -.العينات مشبوهة عند 36 <Ct value <40 ، والتي يجب إعادة اختبارها.
(2) إذا كانت نتائج أي نوع فرعي H5 / H7 / H9 + مع قناة ROX - ، فيجب إعادة اختبارها.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر التضخيم الجيني PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب أن يتم تنفيذ معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة والماصة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، تمت معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، مجمع Bandaohuigu الصناعي ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
شفرة البريد: 262233
هاتف: +86 - 0532 5882 0810
مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / النوع الفرعي العام RNA (اختبار PCR- التألق)
【اسم المنتج】
مجموعة أدوات الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لفيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / النوع الفرعي العام
【طَرد】
50 مجموعة / صندوق
المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
H5 / H7 / H9 / محلول التفاعل الثلاثي التكافؤ العام | 1250 ميكرولتر / أنبوب | 1 |
H5 / H7 / H9 / التحكم الإيجابي العام | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【نموذج】
ABI 7500 و ABI QuantStudio 5 و CFX Connect و CFX Opus 96 و LightCycler480 و Gentiter 96E / 96R و LineGene 9600 Plus ومضخم PCR الكمي الفلوري.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 25 ميكرولتر إلى محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PCR المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، ووضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري ..
2.3 يتم ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
المعلمات ذات الصلة لمكبر الصوت | |||
نظام | الحجم الإجمالي: 30 مايكرولتر | ||
جمع الإشارات
| أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 / عام
| النوع الفرعي H5 - تجمع قناة HEX إشارة التألق | |
النوع الفرعي H7 - تجمع قناة FAM إشارة التألق | |||
النوع الفرعي H9 - تجمع قناة Cy5 إشارة التألق | |||
عام - تجمع قناة ROX إشارة التألق | |||
شروط تفاعل PCR
| منصة | Condition | رقم الدورة |
النسخ العكسي | 55 ℃: 15 دقيقة | 1 | |
الأجيال السابقة | 95 ℃: 30 ثانية | 1 | |
PCR
| 95 ℃: 10 ثوانٍ |
40
| |
56 ℃: 30 ثانية (اضبط لجمع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة) | |||
تفسير النتائج】
1. تحديد فعالية مجموعة الاختبار:
(1) ضعف التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقنوات FAM و HEX و Cy5 و ROX ≤ 32 ، ومنحنى التضخيم بمرحلة أسية واضحة.
(2) التحكم الفارغ: لا تحتوي قنوات FAM و HEX و Cy5 و ROX على منحنى تضخيم ، أو أن منحنى التضخيم مائل مستقيم أو طفيف ، ولا توجد مرحلة أسية كبيرة ، وقيمة Ct ≥ 38 أو لا قيمة Ct.
2. تحديد النتائج:
نتيجة الحكم | قناة FAM | قناة HEX | قناة Cy5 | قناة ROX |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H5 إيجابي | - | + | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H7 إيجابي | + | - | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي H9 من الحمض النووي إيجابي | - | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | + | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H9 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | - | + | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H7 / H9 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / H9 من النوع الفرعي للحمض النووي إيجابي | + | + | + | + |
انخفاض الحمض النووي لفيروس أنفلونزا الطيور الممرض إيجابي | - | - | - | + |
الحمض النووي لفيروس انفلونزا الطيور سلبي | - | - | - | - |
*ملحوظة:
(1) إذا كان هناك منحنى تضخيم طور لوغاريتمي وقيمة Ct ≤ 36 ، فيتم الحكم عليها على أنها +.إذا لم يكن هناك منحنى تضخيم أو قيمة Ct> 36 ، فسيتم الحكم على أنها -.العينات مشبوهة عند 36 <Ct value <40 ، والتي يجب إعادة اختبارها.
(2) إذا كانت نتائج أي نوع فرعي H5 / H7 / H9 + مع قناة ROX - ، فيجب إعادة اختبارها.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر التضخيم الجيني PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب أن يتم تنفيذ معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة والماصة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، تمت معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، مجمع Bandaohuigu الصناعي ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
شفرة البريد: 262233
هاتف: +86 - 0532 5882 0810
