 |
مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA من النوع الفرعي العالمي (اختبار PCR- التألق)
【اسم المنتج】مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA من النوع الفرعي العالمي (اختبار PCR- التألق)
【طَرد】50 مجموعة / صندوق
【إشارة】مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA العالمي (اختبار PCR-Fluorescence Probing) قابلة للتطبيق للكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA العالمي في مسحة حلق الطيور ومسحة العباءة والأنسجة والسائل السماوي لأجنة الدجاج وزراعة الخلايا .نتائج الاختبار لغرض البحث فقط وليس للتشخيص السريري.
【المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
H5 / H7 / محلول التفاعل الثلاثي التكافؤ الشامل | 1250 ميكرولتر / أنبوب | 1 |
H5 / H7 / التحكم الإيجابي العالمي | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
【التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ℃ ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【نموذج】
ABI 7500 و ABI QuantStudio 5 و CFX Connect و CFX Opus 96 و LightCycler480 و Gentiter 96E / 96R و LineGene 9600 Plus ومضخم PCR الكمي الفلوريسنت.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 25 ميكرولتر إلى محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر من الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PRC المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، وضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري.
2.3 يتم ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
المعلمات ذات الصلة لمكبر الصوت | |||
نظام | الحجم الإجمالي: 30 مايكرولتر | ||
جمع الإشارات | أنفلونزا الطيور H5 / H7 / Universal | النوع الفرعي H5 - تجمع قناة HEX إشارة التألق | |
النوع الفرعي H7 - تجمع قناة FAM إشارة التألق | |||
عالمي - تجمع قناة ROX إشارة التألق | |||
شروط تفاعل PCR | منصة | Condition | رقم الدورة |
النسخ العكسي | 55 ℃: 15 دقيقة | 1 | |
الأجيال السابقة | 95 ℃: 30 ثانية | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 ثوانٍ | 40 | |
56 ℃: 30 ثانية (اضبط لجمع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة) | |||
【تفسير النتائج】
1. تحديد فعالية مجموعة الاختبار:
(1) ضعف التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقنوات FAM و HEX و ROX 32 ، منحنى التضخيم مع المرحلة الأسية الواضحة.
(2) التحكم الفارغ: لا تحتوي قنوات FAM و HEX و ROX على منحنى تضخيم ، أو يكون منحنى التضخيم مستقيمًا أو مائلًا طفيفًا ، ولا توجد مرحلة أسية كبيرة ، وقيمة Ct ≥ 38 أو لا قيمة Ct.
2. تحديد النتائج:
نتيجة الحكم | قناة FAM | قناة HEX | قناة ROX |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H5 إيجابي | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H7 إيجابي | + | - | + |
انخفاض الحمض النووي لفيروس أنفلونزا الطيور الممرض إيجابي | - | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | + | + |
الحمض النووي لفيروس انفلونزا الطيور سالب | - | - | - |
*ملحوظة:
(1) إذا كان هناك منحنى تضخيم طور لوغاريتمي وقيمة Ct ≤ 36 ، فيتم الحكم عليها على أنها +.إذا لم يكن هناك منحنى تضخيم أو قيمة Ct> 36 ، فسيتم الحكم على أنها -.العينات مشبوهة عند 36 <Ct value <40 ، والتي يجب إعادة اختبارها.
(2) إذا كانت نتائج أي نوع فرعي H5 / H7 هي + مع قناة ROX - ، فيجب إعادة اختبارها.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر التضخيم الجيني PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب أن يتم تنفيذ معطف المعمل والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة والماصة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، تمت معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، Bandaohuigu Industrial Park ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
الرمز البريدي: 262233
هاتف: +86-0532 5882 0810
مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA من النوع الفرعي العالمي (اختبار PCR- التألق)
【اسم المنتج】مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA من النوع الفرعي العالمي (اختبار PCR- التألق)
【طَرد】50 مجموعة / صندوق
【إشارة】مجموعة أدوات الكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA العالمي (اختبار PCR-Fluorescence Probing) قابلة للتطبيق للكشف عن فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 / RNA العالمي في مسحة حلق الطيور ومسحة العباءة والأنسجة والسائل السماوي لأجنة الدجاج وزراعة الخلايا .نتائج الاختبار لغرض البحث فقط وليس للتشخيص السريري.
【المكونات والمحتوى الرئيسي】
اسم | تخصيص | كمية |
H5 / H7 / محلول التفاعل الثلاثي التكافؤ الشامل | 1250 ميكرولتر / أنبوب | 1 |
H5 / H7 / التحكم الإيجابي العالمي | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
سيطرة سلبية | 250 ميكرولتر / الأنبوب | 1 |
【التخزين ومدة الصلاحية】
تخزينها عند -20 ± 5 ℃ ، التجميد والذوبان المتكرر 3 مرات ، ومدة الصلاحية 12 شهرًا.
【نموذج】
ABI 7500 و ABI QuantStudio 5 و CFX Connect و CFX Opus 96 و LightCycler480 و Gentiter 96E / 96R و LineGene 9600 Plus ومضخم PCR الكمي الفلوريسنت.
【طريقة اختبار】
1. استخراج الحمض النووي
يمكن تنفيذ مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية لاستخراج الحمض النووي ، يرجى اتباع تعليمات المجموعة.
2. تضخيم PCR
2.1 احسب عدد عينات الاختبار ، خذ n + 2 أنابيب تفاعل PCR ، وأضف 25 ميكرولتر إلى محلول التفاعل لكل أنبوب.
2.2 أضف 5 ميكرولتر من الحمض النووي للتحكم السلبي والتحكم الإيجابي والعينات في أنابيب تفاعل PRC المذكورة أعلاه على التوالي ، وأجهزة الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ ، وضعها في مضخم PCR الكمي الفلوري.
2.3 يتم ضبط شروط التفاعل على النحو التالي:
المعلمات ذات الصلة لمكبر الصوت | |||
نظام | الحجم الإجمالي: 30 مايكرولتر | ||
جمع الإشارات | أنفلونزا الطيور H5 / H7 / Universal | النوع الفرعي H5 - تجمع قناة HEX إشارة التألق | |
النوع الفرعي H7 - تجمع قناة FAM إشارة التألق | |||
عالمي - تجمع قناة ROX إشارة التألق | |||
شروط تفاعل PCR | منصة | Condition | رقم الدورة |
النسخ العكسي | 55 ℃: 15 دقيقة | 1 | |
الأجيال السابقة | 95 ℃: 30 ثانية | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 ثوانٍ | 40 | |
56 ℃: 30 ثانية (اضبط لجمع إشارة الفلورسنت في نهاية هذه المرحلة) | |||
【تفسير النتائج】
1. تحديد فعالية مجموعة الاختبار:
(1) ضعف التحكم الإيجابي: قيمة Ct لقنوات FAM و HEX و ROX 32 ، منحنى التضخيم مع المرحلة الأسية الواضحة.
(2) التحكم الفارغ: لا تحتوي قنوات FAM و HEX و ROX على منحنى تضخيم ، أو يكون منحنى التضخيم مستقيمًا أو مائلًا طفيفًا ، ولا توجد مرحلة أسية كبيرة ، وقيمة Ct ≥ 38 أو لا قيمة Ct.
2. تحديد النتائج:
نتيجة الحكم | قناة FAM | قناة HEX | قناة ROX |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H5 إيجابي | - | + | + |
فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي للحمض النووي H7 إيجابي | + | - | + |
انخفاض الحمض النووي لفيروس أنفلونزا الطيور الممرض إيجابي | - | - | + |
فيروس أنفلونزا الطيور H5 / H7 من النوع الفرعي الحمض النووي إيجابي | + | + | + |
الحمض النووي لفيروس انفلونزا الطيور سالب | - | - | - |
*ملحوظة:
(1) إذا كان هناك منحنى تضخيم طور لوغاريتمي وقيمة Ct ≤ 36 ، فيتم الحكم عليها على أنها +.إذا لم يكن هناك منحنى تضخيم أو قيمة Ct> 36 ، فسيتم الحكم على أنها -.العينات مشبوهة عند 36 <Ct value <40 ، والتي يجب إعادة اختبارها.
(2) إذا كانت نتائج أي نوع فرعي H5 / H7 هي + مع قناة ROX - ، فيجب إعادة اختبارها.
【احتياطات】
1. يجب أن تكون إدارة المختبر في توافق صارم مع المواصفات الإدارية لمختبر التضخيم الجيني PCR.يجب تدريب العاملين في المختبر بشكل احترافي.يجب إجراء عملية التجربة بدقة في مناطق مختلفة (منطقة تحضير الكاشف ، منطقة تحضير العينة ، منطقة التضخيم وتحليل المنتج).يجب التخلص من جميع المواد الاستهلاكية بعد التعقيم.لا يجوز استخدام الأجهزة والمعدات والإمدادات الخاصة في كل مرحلة من مراحل التشغيل التجريبي.
2. يرجى تجهيز خزانة السلامة البيولوجية لمرحلة تحضير الكاشف والعينة.يجب أن يتم تنفيذ معطف المعمل والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة والماصة أثناء التجربة.
3. يجب تجنب التجميد المتكرر والذوبان المتكرر للكواشف قدر الإمكان.قبل الاستخدام ، يجب إذابة الكواشف تمامًا وطردها عند 8000 دورة في الدقيقة لعدة ثوانٍ.
4. يرجى وضع الماصة المستخدمة في منطقة تحضير العينة في الحاوية التي تحتوي على مطهر وتجاهلها مع النفايات بعد التعقيم.
5. بعد التجربة ، تمت معالجة منضدة العمل والماصة بـ 10٪ هيبوكلوريت أو 75٪ كحول أو مصباح فوق بنفسجي.
【صناعة】
اسم: شاندونغ شيندا جين التكنولوجيا المحدودة
شركة تابعة لـ Shandong Sinder Technology Co., Ltd
عنوان: المبنى B2 ، Bandaohuigu Industrial Park ، طريق Shungeng ، مدينة Zhucheng ، مقاطعة Shandong
الرمز البريدي: 262233
هاتف: +86-0532 5882 0810
